ODS填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù)，即柱效和背壓。粒度越小，其表面積越大，填充柱的柱效超高；然而粒度越小，柱壓越大，柱壓的增加限制了粒度小于3pm的ODS填料應用。在相同選擇性條件下，提高柱效可提高分離度，但不是因素。

　　如果固定相選擇是正確，但是分離度不夠，那么選用更小粒度的ODS填料是很有用的。3umODS填料填充柱的柱效比相同條件下的5pmODS填料的柱效提高近30%；然而，3um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍。與此同時，柱效提高意味著在相同條件下可以選用更短的色譜柱，即相同的塔板數(shù)或分離能力，但是柱長更短，以縮短分析時間。另外，可以采用低粘度的溶劑做流動相或增加色譜柱的使用溫度，比如用乙睛代替甲醇，以降低色譜柱的壓力。

　　ODS填料操作要點

　　1.首先對流動相進行過濾，根據(jù)需要選擇不同的濾膜，一般為有機系和水系，常用的孔徑為0.20um和0.45um。

　　2.對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。

　　3.正常情況下，儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘，然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑，則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘，直至色譜柱中有機相沖凈為止)。

　　4.一般情況下，流動相沖洗20-30分鐘后，儀器方可穩(wěn)定，重要的是儀器基線走后，方可進樣測試。

　　5.同時進兩針標樣，將其結果相比較，其結果的比值在0.98-1.02之間后，就可以正式進行樣品的測試了。

　　6.樣品測試結束后，就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩沖試劑，同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘，方可用有機相進行保護，否則，有損色譜柱。

　　7.關機時，先關計算機，再關液相色譜。

　　8.填寫登記本，由負責人簽字。

　　ODS填料注意事項

　　1.流動相均需色譜純度，水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。

　　2.柱子是非常脆弱的，次做的方法，先不要讓液體過柱子。

　　3.所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。

　　4.壓力不能太大，不要超過150kgf/cm2。

　　5.因為緩沖試劑遇有機溶劑，會結晶，有損色譜柱，所以，每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水清洗。