在高效液相分析檢測樣品的過程中,色譜柱會受到來自于樣品及色譜系統(tǒng)的污染,從而導致色譜柱耐用性差、壽命縮短。
來自于色譜系統(tǒng)的污染主要指,HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒,以及流動相系統(tǒng)過濾不*殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指,未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進入色譜系統(tǒng)中,由于樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異,導致沉淀析出污染系統(tǒng)。特別是對于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測,因基質的復雜性,色譜柱受污染的情況會更加嚴重。污染會導致色譜系統(tǒng)壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等,從而帶來檢測成本高,測試結果不準確等各種影響。
保護柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟和有效的保護,延長了色譜柱的壽命,保證分析結果的重現(xiàn)性。隨著使用時間的增加,高效液相色譜柱分離效能下降,柱壓增高,其原因主要是由于色譜柱進口段的少量填料被污染引起的,而色譜柱整個柱床并未被破壞,使用保護柱,相當于在色譜柱前增加了一段額外的填料,起到了保護整個色譜柱的作用。