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液相色譜柱的化學(xué)性質(zhì)包含哪些

更新時間:2020-10-09      點擊次數(shù):1807
   液相色譜柱的化學(xué)性質(zhì)包含哪些
  液相色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),填料技術(shù)自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,更多是一門藝術(shù),需要經(jīng)驗積累。
  隨著HPLC的普及,分析方法學(xué)的開發(fā)成為一個合格的分析研究員的標配,而色譜柱的篩選是分析方法開發(fā)的一步,也是重要的一步,好的分析研究員可以根據(jù)化合物的結(jié)構(gòu)特征很快確立所需的色譜柱,然后根據(jù)化合物的Pka,logP確立流動相。
  液相色譜柱的化學(xué)性質(zhì)有以下這些:
  1、硅膠基質(zhì):通用的基質(zhì),強度大,化學(xué)修飾容易,但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,特殊修飾的可以達到1—12)。
  2、聚合物基質(zhì):多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化學(xué)穩(wěn)定,應(yīng)用pH范圍寬,具有更強的疏水性,對蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好;但強度較小,有機溶劑可能導(dǎo)致聚合物溶脹而受損,批次重復(fù)性較差,商品化色譜柱不多,一般價格較貴。
  3、載碳量:基質(zhì)表面鍵合相的比例,載碳量高,則保留增加,適合分析非極性化合物。
  4、鍵合相:鍵合試劑不同,對化合物的選擇性不同,一般長鏈的烷基鍵合相(C18 C8)比短鏈的(C4 C3)穩(wěn)定;非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩(wěn)定。
  5、封端:用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來,以減少殘留的硅醇基,減輕待測組分與酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象。尤其對于極性樣品而言,未封端處理的色譜柱分離效果較差。
  好了,以上便是關(guān)于液相色譜柱的相關(guān)內(nèi)容介紹了。
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