色譜填料又稱為層析介質(zhì),分為親水型色譜填料和疏水型色譜填料兩種。
1.親水色譜填料:
主要適用于非極性至中等極性的中小分子化合物的分離,硅膠表面的硅羥基或其極性基團(tuán)極性較強(qiáng)。主要應(yīng)用于藥物合成化學(xué)、天然產(chǎn)物、精細(xì)化工、石油產(chǎn)品等領(lǐng)域的分離和提純。
2.疏水色譜填料:
在傳統(tǒng)固定相長(zhǎng)鏈根部嵌入特殊基團(tuán),該“極性嵌入基團(tuán)”能夠和硅膠表面的硅羥基或流動(dòng)相中的水形成氫鍵,對(duì)硅膠基質(zhì)形成一種保護(hù)作用,且減少堿性化合物與硅羥基的作用,保證了堿性化合物的良好分離,對(duì)具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的堿性化合物表現(xiàn)出不同于傳統(tǒng)反相色譜的分離性能,即不需要“使用pH>7的流動(dòng)相來(lái)抑制堿性物質(zhì)的解離”的方式就可以對(duì)堿性物質(zhì)實(shí)現(xiàn)良好的色譜保留;對(duì)復(fù)雜的樣品分離,如混合物中同時(shí)具有極性、中性和非極性的化合物時(shí),可以實(shí)現(xiàn)一次分離,而且抗污染能力出色;鍵合相流失率極低,保留性能穩(wěn)定。
色譜填料的基本特點(diǎn):
1.五大類層析技術(shù)
①凝膠過(guò)濾(GF)
?、陔x子交換(IEX)
?、塾H和層析(AC)
④疏水層析(HIC)
?、莘聪鄬游觯≧PC)
2.基架:顆粒越細(xì)、大小越均勻,分辨率越高,但反壓亦較高(SOURCE基架例外)
3.物理穩(wěn)定性:新一代介質(zhì)較堅(jiān)固,能承受高流速,但反壓亦較高(SOURCE基架例外)
4.化學(xué)穩(wěn)定性:新一代介質(zhì)能承受PH,高鹽度,促溶劑和有機(jī)溶劑,利于開(kāi)發(fā)分離條件和在位清洗(CIP),大大延長(zhǎng)介質(zhì)壽命并提高重復(fù)性。