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現(xiàn)代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,首先必須對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。下面將對(duì)幾種常見的色譜柱填料極其各種的性能做各一個(gè)簡(jiǎn)要的介紹。(1)硅膠填料硅膠填料主要應(yīng)用正相色譜及反相色譜柱中,正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團(tuán),如胺基團(tuán)(NH2,APS)和氰基團(tuán)(CN,CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性較強(qiáng),因此,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的...
使用高效液相色譜(HPLC)來分析樣品被廣泛應(yīng)用于藥物組分分析、食品添加劑測(cè)定和環(huán)境樣品測(cè)試等。由于液相色譜柱是許多實(shí)驗(yàn)室的核心設(shè)備且成本高昂,因此保護(hù)柱子免受損壞是延長(zhǎng)色譜柱壽命和降低成本的首要考慮因素。維護(hù)良好的色譜柱還能產(chǎn)生一致且準(zhǔn)確的數(shù)據(jù),為可靠的分析結(jié)果提供支持。如何提高分析色譜柱性能?色譜柱性能取決于多種因素,包括樣品特性、不溶性顆粒的存在以及使用后的清潔維護(hù)等。但是在使用過程中,并不是所有實(shí)驗(yàn)條件都是理想條件。例如,某些樣品具有苛刻但必要的pH條件。因此,對(duì)于液...
液相色譜儀除了日常維護(hù)保養(yǎng)外,使用高純度溶劑不僅能保護(hù)液相系統(tǒng),也能增加結(jié)果的可靠性。HPLC級(jí)表示化學(xué)試劑的純度,是可在高效液相色譜中使用的試劑的純度,制備色譜法、平行分析或梯度分析需要使用到不同的HPLC級(jí)試劑。樣品在注入液相系統(tǒng)前,必須選擇一種合適的HPLC溶劑。在反相高效液相色譜中,當(dāng)樣品溶劑與流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度有差異,尤其是前者的洗脫強(qiáng)度較強(qiáng)時(shí),就會(huì)產(chǎn)生峰的變形及柱效的降低。解決該問題有效的方法是使用流動(dòng)相作為溶劑溶解樣品,這樣既可以避免樣品溶劑和流動(dòng)相之間任何強(qiáng)度或...
樣品過濾是制備色譜分析樣品的關(guān)鍵步驟。實(shí)驗(yàn)前如果不過濾樣品會(huì)導(dǎo)致色譜柱篩板堵塞等問題,從而導(dǎo)致背壓增高和色譜柱性能下降。最終,這會(huì)增加花在色譜儀故障排除和維護(hù)上的時(shí)間,浪費(fèi)時(shí)間也增加科研人員的工作量。對(duì)于大多數(shù)類型的樣品,過濾處理相對(duì)比較簡(jiǎn)單。在進(jìn)樣前用溶劑進(jìn)樣口過濾器對(duì)流動(dòng)相過濾。這一步也非常重要,用色譜過濾頭可有效濾除流動(dòng)相中的固體顆粒雜質(zhì);未經(jīng)過濾的溶劑或溶劑瓶中生長(zhǎng)的微生物都會(huì)降低液相色譜柱和泵的性能。使用一段時(shí)間后需要定期清洗或更換溶劑入口濾頭。在食品和飲料行業(yè)分析...
HPLC一般指高效液相色譜,是一種多功能的分析方法,可對(duì)各種化合物進(jìn)行分離和定量。它廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用、藥物分析、食品分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、精細(xì)化工產(chǎn)品分析等眾多領(lǐng)域。HPLC的技術(shù)都具有基本原理,比如樣品引入,色譜柱中樣品組分的分離以及最后使用多種檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。想了解制備型HPLC要先對(duì)分析型HPLC進(jìn)行初步研究,兩種技術(shù)之間的基本區(qū)別是操作規(guī)模,下面將重點(diǎn)介紹區(qū)別:明確分析的目標(biāo)在進(jìn)行分析之前,你應(yīng)該對(duì)分析目標(biāo)有清楚的了解。你是希望獲得有關(guān)樣品成分純度的信息然后進(jìn)...
液相色譜儀是比較常用的實(shí)驗(yàn)室儀器,但是即使是經(jīng)驗(yàn)豐富的人也容易忽略一些小細(xì)節(jié),別小看這些被忽略的細(xì)節(jié),很可能會(huì)影響你的色譜儀器或者是分析結(jié)果!一些小故障也是由于不注重細(xì)節(jié)產(chǎn)生的,色譜新手也需要注意!流動(dòng)相一定要過濾!有些色譜操作者可能會(huì)想,我不是用的分析級(jí)的純水流動(dòng)相嗎?為什么還要過濾呢?答案是:新制備好的流動(dòng)相,在室內(nèi)靜置幾天后,容易滋生細(xì)菌。特別是南方,夏季炎熱更容易滋生細(xì)菌污染了流動(dòng)相!恒譜生建議:流動(dòng)相即配即用,如果要用間隔時(shí)間比較久的流動(dòng)相,一定要過濾!否則滋生細(xì)菌...